METODOLOGIAS DE EXTRAÇÃO DE DNA EM VIDEIRA PARA ANÁLISES RAPD E AFLP1

Resumo

Gênero  Vitis é de grande importância econômica mundial e esta se tomando assunto de diversos estudos genéticos. O objetivo do presente trabalho é avaliar a qualidade de DNA extraído de folhas jovens de 19 cultivares de videira, utilizando seis métodos de extração - Saghay-Maroof, Soleman e Allard (1984); Shillito e Saul (1988); Doyle e Doyle (1991); Lodhi et al.(1994); This, Cuisset e Boursiquot (1997) e Line Kuo (1998) - para analise RAPD e AFLP. O DNA obtido foi quantificado por espectrofotometria e sua qualidade foi avaliada por eletroforese em gel de agarose a 0,8% corado com brometo de etidio (0,05 g/mL). Para analise PCR-RAPD utilizaram-se sete iniciadores de síntese (B12, B13, C12, D6, E10,J5 e UBC 301). Apos eletroforese em gel de agarose a 1,5%, os resultados foram visualizados em Gel-doc. Pela extração descrita por Shilito e Saul (1988) não, se obteve DNA em nenhuma das cultivares, o mesmo aconteceu quando se utilizou a metologia de Line Kuo (1998) quando as cultivares foram os porta-enxertos. Apesar das demais metodologias possibilitarem a extração de DNA suficiente, esses DNAs apresentaram-se degradados ou não amplificaram, com exceção de Lodhi et al. (1994), para analises PCR-RAPD, e Doyle e Doyle (1991), para analises AFLP.